Fast Fungi

1) Incluido:
- Bolsa microfiltrada con substrato de crecimiento y puerto para inyección

- Vial de Cultivo Líquido MycoMate®

- Hisopos con alcohol estériles

- Bandeja de fructificación

- Bolsa de vermiculita

- Bolsa de fructificación microfiltrada

2) Vas a necesitar:

-Llama de gas (un encendedor "tipo soplete" funciona bien)

- Tazón limpio para mezclar

- Atomizador de mano

- Las esporas que quieras inocular en el kit.

- Manos limpias y un área aseada para trabajar

3) Inoculación:

Hay dos opciones para inocular (inyectar) el kit de hongos Fast Fungi:

A. Esporas:

Puedes inyectar las esporas directamente en el sustrato de crecimiento. Esta opción representa un poco menos de trabajo, pero lleva más tiempo que fructifique el kit y no siempre germinan las esporas suficientes. Si escoges esta opción vete directamente al paso 1.)(Ver mas abajo).

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B. Vial de cultivo líquido:

Para lograr una colonización más rápida y un mayor rendimiento, primero debe inocular y colonizar un vial de cultivo liquido y posteriormente inyectar el cultivo líquido dentro de la bolsa de sustrato de crecimiento. Las esporas que producen trufas pueden requerir mas tiempo para germinar sobre grano que las esporas que producen hongos, de manera que el cultivo liquido puede servir de atajo. Si esta es la opción que has escogido sigue los pasos del B1 al B10, si no ve directamente al punto 1).

B1) Si el medio líquido de cultivo se encuentra refrigerado, retírelo del refrigerador y almacénelo a temperatura ambiente 24 horas antes de usarlo.

B2)   Lávese muy bien las manos (el uso de jabón antibacterial es opcional). Séquese con una toalla limpia (p. ej. con toallas de papel).

B3)   Retire el vial de la bolsa y ubique en una mesa limpia en un área aseada, libre de residuos.

B4)  Aplique alcohol sobre el puerto de inyección del Vial de Cultivo Líquido y cualquier otro lugar destinado a ser inyectado (p. ej. vial de esporas o Vial de Cultivo Líquido). Utilice un hisopo limpio por cada producto que deba humedecer, con el fin de reducir la contaminación mutua. No exhale directamente sobre los sitios de inyección.

B5)   Retire la jeringa y la aguja de la bolsa. Retire la cubierta de plástico que protege la aguja (gire en el sentido de las manecillas del reloj y hale).

No permita que la aguja entre en contacto con ningún objeto, pues de lo contrario deberá volver a ser esterilizada. En caso de utilizar una jeringa de cualquier otro proveedor, ésta deberá también ser esterilizada.

Las agujas pueden ser esterilizadas con una llama. Es deseable que la aguja quede al rojo vivo, teniendo cuidado de no sobrecalentar y derretir el área donde la aguja está adherida al plástico. Siempre deje enfriar la aguja antes de inyectarla

B6)  Si se utiliza un vial de esporas o de Cultivo Líquido colonizado, agite vigorosamente para mezclar la suspensión. Sostenga el vial en un ángulo, inyecte con la jeringa, y extraiga la cantidad deseada de suspensión.

B7)  Inyecte varias gotas de suspensión de cultivo (es decir, líquido colonizado del vial de cultivo) o entre varias gotas y 1 ml de suspensión de esporas (dependiendo de la densidad de la solución de esporas) en el Vial de Cultivo Líquido. Retire la aguja muy lentamente, pues de lo contrario la presión puede ocasionar que un poco del líquido sea rociado afuera—lo cual no representa problema alguno.

B8)  Limpie el puerto de inyección del Vial de Cultivo Líquido con un hisopo limpio humedecido en alcohol; deje secar, y almacene verticalmente en una bolsa plástica de cierre hermético.

B9)   Agite vigorosamente el vial una vez al día durante diez segundos y almacene lejos de la luz solar. Incube las especies de hongos a la temperatura apropiada (generalmente de 23º a 27º C). Una temperatura menor retrasa el tiempo de germinación y colonización de las esporas. Sin embargo, una temperatura demasiado alta (por encima de 27º C) incrementa el riesgo de contaminación.

Nota: Los requerimientos de temperatura dependen de la especie.

B10) El crecimiento es similar tanto con esporas como con Cultivo Líquido. Sin embargo, el crecimiento con esporas tarda más que con éste último.

Suspensión de esporas: Las esporas generalmente tardan entre 24 y 72 horas en germinar, y entre 3 y 7 días deberá ser observable la colonización del medio líquido creciendo en los dos tercios inferiores del vial.

Nota: Los Viales de Cultivo Líquido MycoMate® requieren de muy pocas esporas para su crecimiento.

Cultivo líquido: El crecimiento se hace evidente durante las 24 horas siguientes a la transferencia del micelio desde un vial colonizado de Cultivo Líquido a viales de Cultivo Líquido frescos. Los viales frescos generalmente son colonizados tras varios días (dependiendo de la especie, variedad, y temperatura).

La observación es más efectiva cuando se sostiene con cuidado el vial a trasluz, evitando agitar. El sedimento del medio de cultivo puede agitarse si no se es lo suficientemente cuidadoso, haciendo más difícil identificar el crecimiento (esto no representa problema, pues al rato el sedimento se asentará nuevamente en el fondo). Hilos blancos de micelio (hongo) flotarán hacia la superficie a medida que levanta el vial. Deberá haber una pequeña nubosidad alrededor del micelio, pero el vial completo no debe estar opaco. El área alrededor de la nubosidad del micelio deberá ser razonablemente transparente. Si el vial es levantado lentamente y sin embargo aparece completamente opaco es posible que se encuentre contaminado. Deje reposar el vial sin ninguna perturbación durante varias horas y revise nuevamente para descartar que se trate de sedimento proveniente del fondo lo que oscurecía el vial. Éste puede ser utilizado tan pronto como haya crecimiento saludable o después de una o dos semanas cuando el vial muestre mayor colonización.

Nota: Cuando entre uno y dos tercios del vial han sido colonizados deberá ser utilizado o almacenado bajo refrigeración para uso posterior (ver abajo).

B11)  Cuando la colonización esté completa el vial puede ser usado para inocular otros Viales MycoMate® de Cultivo Líquido (repitiendo los pasos del B1 al B10), Kits MycoMate®  para Hongos Comestibles o Esclerocios (repitiendo los pasos del B1 al B6)

1)   Lávese muy bien las manos (el uso de jabón antibacterial es opcional). Séquese con una toalla limpia (p. ej. con toallas de papel).

2) Sostén el puerto de inyección de la bolsa de sustrato con una mano, levanta las dos pestañas plásticas con la otra mano y rasga cuidadosamente la cubierta plástica que protege el puerto de inyección. Aplica alcohol con un hisopo limpio y deja secar.

3) Retira la jeringuilla y la aguja de la bolsa, retira la cubierta de plástico que protege la aguja (gira en el sentido de las manecillas del reloj). No permitas que la aguja entre en contacto con ningún objeto, de lo contrario tendrás que volver a esterilizarla.

Las aguas pueden ser esterilizadas con una llama, es deseable que la aguja quede al rojo vivo, teniendo cuidado de no sobrecalentar y derretir el área donde la aguja esta adherida al plástico, dejar enfriar la aguja antes de inyectar. Evita exhalar sobre la aguja o el área de inyección.

4) Empuja la aguja de la jeringuilla a través del puerto de inyección de la bolsa de sustrato.

Esporas: Utiliza el puerto de inyección para guiar la aguja e inyectar de1 a 2 ml en cada esquina y paralelo a los lados de la bolsa de sustrato. Incluya varias gotas sobre el sustrato mismo. Mientras mas uniforme sea la inyección en el sustrato más rápida será la colonización.

Vial de cultivo liquido: Utiliza el puerto de inyección para guiar la aguja e inyectar de1 a 2 gotas en cada esquina y paralelo a los lados de la bolsa de sustrato. Deja que la solución gotee sobre los lados de la bolsa de sustrato. Incluya varias gotas sobre el sustrato mismo. Cada gota de cultivo representa un punto de crecimiento, por lo tanto cuanto mas uniforme sea la inyección en el sustrato más rápida será la colonización.

4) Colonización:

Incube la bolsa a oscuras y a la temperatura apropiada, entre 23 y27ºC.

Esporas: En el lapso de varios días a dos semanas las esporas germinaran (pequeñas aglomeraciones de aspecto algodonado) y el hongo colonizara la bolsa en el transcurso de varias semanas. Si la germinación no se encuentra distribuida de manera uniforme a lo largo de la bolsa durante los siguientes 14 a 22 días, puede acelerar la colonización mezclando cuidadosamente el contenido de la bolsa. Haga esto una sola vez, de manera que los hongos puedan completar la colonización.

Cultivo liquido: En el lapso de 24 a 72 horas el hongo cobrar vida y en el transcurso de una a dos semanas colonizara el sustrato, dependiendo de la especie y la variedad.

Contaminación: Si el 'pastel' de hongos (las germinaciones) adquieren un color distinto al blanco, revise la especie que está cultivando para corroborar si esto es normal. Los contaminantes mas comunes que usted puede encontrar son bacterias (ausencia de crecimiento del hongo, aspecto lechoso) y mohos verdes.

¡NUNCA ABRA UNA BOLSA CONTAMINADA!

Cuando parezca que el hongo ha colonizado el substrato por completo, espere entre 5 y 7 días más para asegurar que el interior del substrato está también completamente colonizado. El 'pastel' de hongos estará listo para ser remojado y fructificado.

5) Remojo:

El remojo rehidrata el 'pastel' de hongos e incrementa de manera substancial el rendimiento.

1. Lávese muy bien las manos (el uso de jabón antibacterial es opcional). Séquese con una toalla limpia (p. ej. con toallas de papel).

2. Retire cuidadosamente el 'pastel' de hongos de la bolsa de substrato y ubíquelo en un contenedor limpio (p. ej. tazón para mezclar, contenedor plástico hermético).

3. El mejor método consiste en poner el 'pastel' de hongos en una bolsa plástica de sellado hermético llena con agua hasta que quede sumergido por completo. Saque el aire sobrante de la bolsa hasta que quede llena y póngala de nuevo en el contenedor. Se puede logar lo mismo llenando un recipiente con agua limpia (agua destilada preferiblemente) hasta el que 'pastel' de hongos esté completamente sumergido. Es necesario poner un objeto liviano sobre el 'pastel' para mantenerlo sumergido.

4.    Deje el recipiente sellado en el refrigerador (¡nunca en el congelador!) durante una noche (o alrededor de unas 12 horas). Después de varios grupos de hongos cultivados,

'pastel' de hongos completamente deshidratado puede ser remojado hasta por 24 ras.

6) Fructificación:

1. Lávese muy bien las manos (el uso de jabón antibacterial es opcional). Séquese con una toalla limpia (p. ej. con toallas de papel).

2. Vierta la vermiculita en un tazón para mezclar limpio.

3. Añada 100 ml de agua a la vermiculita, mezclando bien. Mezcle durante varios minutos hasta que la vermiculita esté completamente húmeda.

4. Esparza la vermiculita de manera uniforme sobre el fondo de la bandeja de fructificación.

5. Retire el 'pastel' de hongos del refrigerador y enjuague bien bajo el chorro de agua corriente (y fría).

6. Ponga el 'pastel' de hongos sobre la vermiculita en el centro de la bandeja de fructificación.

7.    Ponga la bandeja en la bolsa de fructificación y rocíe con agua varias veces los lados de la bolsa. Doble la aleta superior de la bolsa de fructificación varias veces y ciérrela con un sujetapapeles o un clip para ropa.

8.    Ubique la bolsa en un lugar donde haya luz solar filtrada (no directa), o bajo luces fluorescentes. Mantenga una temperatura apropiada (generalmente entre 22º y 25º C). La fructificación resulta mejor si el interior de la bolsa se mantiene húmedo rociando ligeramente agua con un atomizador una o dos veces al día, según sea necesario. Evite rociar demasiada agua directamente sobre los hongos (un rocío ligero está bien).

9.    En un lapso de varios días a dos semanas podrá ver los hongos comenzando a aparecer. Pueden ser recogidos cuando estén maduros girando la base del tallo con cuidado y tirando del hongo hacia arriba.

10.  Cuando cada grupo de hongos haya sido cultivado por completo, tome un cuchillo o tenedor limpio y remueva cuidadosamente todos los hongos abortados del 'pastel'. Éste deberá ser bien enjuagado bajo el chorro de agua corriente limpia y fría, y remojado nuevamente para restituirle la humedad (repita los pasos #1 a #4 de la sección sobre Remojo). Esparza la vermiculita usada sobre la bandeja de fructificación y rocíe varias veces con agua para rehidratar. Después del remojo, el 'pastel' deberá ser devuelto al centro de la bandeja dentro de la bolsa de fructificación y el proceso de fructificación repetido.

11.  Mantenga húmedos los lados de la bolsa de fructificación y remoje el 'pastel' de hongos después de cosechar cada grupo de los mismos. Son de esperarse tres o más grupos.

ALTERNATIVA:

OPCIONES DE FRUCTIFICACIÓN Y EXPERIMENTACIÓN:

Mantenimiento bajo:

Usted puede escoger fructificar los hongos sin remover el substrato de la bolsa en la que creció. Aunque no todas, muchas especies y variedades de hongos pueden fructificar de esta manera. Después de que el pastel haya sido completamente colonizado, ponga entre 1 y1.5 cmaproximadamente de vermiculita húmeda (no mojada) directamente sobre el 'pastel' de hongos, en la bolsa más pequeña en la que creció. Cierre la bolsa con el filtro, incube a una temperatura adecuada bajo luz del sol filtrada (no directa) o bajo luz fluorescente, y espere la aparición de los hongos. Después de cosechar, rocíe varias veces la superficie de la vermiculita y cierre la bolsa. Espere al siguiente grupo de hongos, coseche, y repita. Remojar entre grupos puede con frecuencia incrementar el rendimiento con esta técnica.

Libre de mantenimiento:

De manera alternativa, usted puede simplemente fructificar los hongos en las bolsas en las que los 'pasteles' crecieron originalmente sin estar cubiertas por ningún tipo de recipiente. Aunque no todas, muchas especies y variedades de hongos pueden fructificar de esta manera.

Después de que el 'pastel' haya sido completamente colonizado, ponga bajo luz del sol filtrada (no directa) o bajo luz fluorescente y mantenga una temperatura adecuada para la fructificación. Después de recoger cada grupo de hongos simplemente vuelva a cerrar la bolsa y aguarde al siguiente grupo. Remojar entre grupos puede con frecuencia incrementar el rendimiento con esta técnica.

Encapsulamiento:

Muy lentamente, añada +/-100ml de agua a la vermiculita, asegurándose de mezclar bien. Lo que se busca es que ésta quede humedecida de manera uniforme. Esto significa que usted puede exprimir con fuerza la vermiculita en su mano y que sólo unas cuantas gotas de agua caigan a través de sus dedos. Esparza la mitad de ésta de manera uniforme sobre la bandeja de fructificación. Aparte la otra mitad.

Divida el 'pastel' colonizado de hongos en pedazos pequeños, o córtelo con un cuchillo limpio en cubos de2 a3 cm. Esparza de manera uniforme en el fondo de la bandeja de fructificación. Con una cuchara y/o manos limpias, esparza cuidadosamente la vermiculita sobre toda la superficie de los hongos (cubriéndolos aproximadamente entre 0.5 y1 cmde profundidad). No compacte el substrato. Ponga la bandeja en la bolsa de fructificación microfiltrada, rocíe ligeramente con agua y cierre bien con un sujetapapeles o un clip para ropa. Mantenga húmeda (no mojada) la superficie del encapsulamiento de vermiculita mediante rociado diario (1 o 2 veces al día). Cuando comience a ver hongos pequeños formándose, cuide de no rociar en exceso el encapsulamiento. Espere hasta que el grupo de hongos sea cosechado y entonces rocíe un poco de agua adicional en el transcurso de varios días para rehidratar la vermiculita.